Гістологічна техніка

гістологічна техніка

Гістологічне ТЕХНІКА, комплекс методич. прийомів, використовуваних в гістології та Патол. анатомії при виготовленні препаратів клітин, тканин і органів для їх подальшого микроскопирования. Приготування постійних гістол. препаратів у вигляді тонких зрізів складається з слід. осн. етапів: фіксації, промивання, зневоднення і заливки шматочків, приготування зрізів, фарбування, зневоднення і ув`язнення.
Фіксація - збереження структури і в деякої міри химич. складу клітин і тканин шляхом швидкого впливу на них хімічних. або физич. агентів, що запобігають розвитку посмертних змін. Для фіксації використовують розчини формальдегіду (4% -ві), глютаральдегіду (2-6% -ні), здатні фіксувати суміші, що містять оцтову к-ту (рідина Карнуа), пікринову к-ту (рідина Буена).
Один з кращих фіксаторів, який використовується в електронномікроскопіч. дослідженнях, - р-р четирёхокісі [чотириокису] осмію. При застосуванні повільно проникають фіксаторів (чотириокис [чотириокис] осмію, глютаральдегид) товщина шматочків тканин повинна бути не більше 2 мм.
Найкращі результати дає щодо тривала фіксація при t 2-4 ° С. Обизвествлённие [Звапнілі] тканини і структури після фіксації піддають декальцінаціі - обробці к-тами (азотної, соляної та ін.) Або електричні. струмом. Після закінчення фіксації шматочки промивають у воді або спирті.
Подальша обробка полягає в доданні шматочках однорідної щільної консистенції, що необхідно для отримання тонких зрізів. Це досягається або шляхом заморожування шматочків, або шляхом просочування - заливки їх різними застигає середовищами. При виготовленні зрізів на заморожувати мікротому (рис. 1) заморожування об`єктів досягається або рідкою вуглекислотою, або за допомогою термоелектріч. охолоджуючого столика ТОС.
У мікротому-криостате МК-25 (рис. 2) є камера з низькою температурою, в к-рую укладений мікротом. З середовищ для заливки частіше застосовують парафін і целлоідін.Прі заливці в парафін відмиту від фіксатора тканину зневоднюють (через спирти зростаючої фортеці), проводять через проміжний розчинник (ксилол або хлороформ) і просочують парафіном при t 55-56 ° С, потім, швидко охолоджуючи шматочки, отримують парафінові блоки.
При заливці в целлоидин проміжним розчинником є спирт - ефір (1: 1). Для отримання зрізів з парафінових і целлоідінових блоків використовують санний мікротом (рис. 3). Фарбуванням зрізів досягають контрастування різних структур клітин і тканин, по-різному сприймають ті чи інші барвники.
Фарбують зрізи після видалення з них парафіну (ксилолом), проводки їх через спирти знижується концентрації і промивання у воді. Способи фарбування препаратів різноманітні. З основних барвників частіше використовують гематоксилин, кармін, сафранін, метиловий зелений, галлоціанін- з кислих - еозин, еритрозин, кислий фуксин, індигокармін і ін.
Спец. барвники виділяють певні компоненти клітин і тканин, напр, слиз забарвлюється муцікарміном, еластичний. елементи - орсеїном і ін. Для приготування препаратів нервової тканини застосовують суправітально забарвлення метиленовим синім і різні методи імпрегнації - відновлення нервовими структурами металів, гл. обр. срібла.
Після забарвлення добре промиті препарати зневоднюють в спиртах висхідної фортеці (до 100%), прояснюють в суміші карболової к-ти і ксилолу (1: 3), витримують в 2 порціях ксилолу і потім укладають в середовище, яке забезпечує збереження структур об`єкта, його забарвлення і прозорість (рис. 4), застосовуючи для цього канадський або смерековий бальзам, полістирол і ін.
У випадках, коли препарат не можна приводити в контакт з ксилолом, спиртом, використовують для укладення водорозчинні середовища (гліцерин, желатин або їх суміші). Для вивчення свіжого матеріалу (живих або переживають об`єктів) виготовляють тимчасові гістол. препарати, в яких брало об`єкт укладають в физиол. розчини.
Великі можливості для прижиттєвого дослідження клітин дає метод культури тканин. Див. Також Мікроскопічна техніка, Мікроскопія. Літ. Ромейс Б. Мікроскопічна техніка, пер. з нім. М. 1954- Роськин Р. І. Левінсон Л. Б. Мікроскопічна техніка, 3 вид. М. 1957.

Джерело: Енциклопедичний сільськогосподарський словник-довідник.
Автор: Мальченко В.М. 1959 р

• Полівалентні вакцини - полівалентна ВАКЦИНИ (від грец. Polys - численний, лат. Valentia - сила і вакцина), політіповие, поліваріантні, поліштаммовие вакцини, вакцини, що складаються з неск. штамів, типів або варіантів збудника однієї хвороби. Можуть бути бівалентні, тривалентні і т. Д.Напр. П. в. проти лептоспірозу тварин складається з 8 серологиче. варіантів.

• Гіркоти - ГІРКОТИ (Amara), ліків. кошти з різко вираженим гірким смаком. Близькі за хім. структурою до гликозидам. Містяться в рослинах. Ростить. ліків. сировину містить або тільки чисті Г. (листя трилисника, трава золототисячника, коріння тирлич), або поряд з Г. і ефірні масла - ароматіч.Г. (Трава полину, кореневища лепехи і ін.). Г. стимулюють

• Збори - ЗБОРИ лікарські (Species), ліків. форми, що представляють собою суміш дек. видів подрібненого [подрібненого], рідше цільного ростить. ліків. сировини, іноді з домішкою солей, ефірних масел. З С. готують припарки, відвари, настої. Іноді їх дають тваринам всередину в сухому вигляді з концентратами або водою.

Цікаве в блогах

ЦЕНТР ПО сапропелю