Найшвидший тест на вагітність
Відео: Перші ознаки вагітності до ЗАТРИМКИ. На ранніх термінах. Як визначити вагітність. виділення
Лабораторні способи виявлення мікобактерій туберкульозу
Лабораторна діагностика постачає виконання основного завдання діагностики і лікування туберкульозу - виявлення у хворого МБТ.
Відео: Тест на вагітність, дізнатися по тесту позаматкову вагітність?
У лабораторну діагностику на сучасному етапі входять наступні методики:
- збір і обробка мокротиння;
- мікроскопічна ідентифікація МБТ в виділяються субстанціях або тканинах;
- культивування;
- визначення резистентності до препаратів;
- серологічні дослідження;
- застосування нових молекулярно-біологічних методів, включаючи полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) і визначення поліфіморфізма довжин рестрикційних фрагментів (ПДРФ).
Збір мокротиння, що містить МБТ, проводиться в намір підготовленому приміщенні поліклініки або в амбулаторних умовах. Зібрані зразки повинні бути терміново відіслані для мікробіологічного вивчення.
Відео: НАЙПЕРШІ ОЗНАКИ ВАГІТНОСТІ 1-і ТИЖНЯ / ТЕСТИ НА ВАГІТНІСТЬ
Для цього потрібно застосовувати особливі контейнери. Вони повинні бути міцними, стійкими до руйнування, мати широку горловину з герметично загвинчується пробкою, щоб не допустити випадкове витікання з неї вмісту.
Існує два типи контейнерів. Один - розповсюджуваний міжнародною організацією UNICEF (Дитячий фонд ООН) - є пластмасовою колбою з темним підставою, прозорою кришкою, утилізація якого можливо забезпечена спалюванням. На контейнері (нема на кришці) зазначаються дані обстежуваного.
Інший тип контейнера зроблений з особливо міцного скла з кришкою, що загвинчується. Такий контейнер може багаторазово використовуватися після закінчення дезінфекції, кип`ятіння (10 хв) і повного очищення.
При зборі зразків ризик інфікування великий, особливо в той час, коли хворий викашлівает мокроту. Внаслідок цього процедуру потрібно проводити як можливо далі від сторонніх осіб і в особливому приміщенні.
Додаткові процедури для збору МБТ
Забір зразків з гортані тампоном. Оператор повинен носити маску і закритий халат. Мова хворого витягується з рота, в один момент вводиться тампон за мовний простір ближче до гортані. Протягом кашлю хворого можливо зібрати частину слизу. Тампон поміщається в закриту посудину і направляється в бактеріологічну лабораторію.
Промивні води бронхів. Для своєчасної діагностики туберкульозу легенів та інших органів величезне значення має раннє розпізнавання ураження бронхів. Для даної мети в практиці використовується вивчення промивних вод бронхів. Методика отримання промивних вод не складна, але потрібно не забувати про протипоказання до її застосування. Людям похилого віку промивання бронхів направлятися робити з великою обережністю. Процедура протипоказана при бронхіальній астмі і явищах серцево-легеневої недостатності.
Для отримання промивних вод бронхів хворому анестезують дихальні шляхи. Гортанним шприцом вводять 15-20 мл фізіологічного розчину, підігрітого до 37 ° С. Це підсилює секрецію слизовій оболонці бронхів. Відкашлюючись, хворий виділяє промивні води. Їх збирають в стерильний посуд і обробляють простим методом для бактеріоскопії та посіву на середовищах для вирощування МБТ. Проводиться вивчення окремого бронха або цілого розгалуження. Спосіб бактеріоскопії промивних вод і особливо їх посів сприяє підвищенню числа знахідок МБТ на 11-20%.
Промивні води шлунка. Промивні води шлунка часто досліджуються у дітей, якісь не можуть відкашлювати мокротиння, і у дорослих при мізерному кількості мокротиння. Спосіб не важкий і дає великий відсоток виявлення МБТ в промивних водах шлунка у хворих не тільки на легеневий туберкульоз, а й на туберкульоз інших органів (шкіри, кісток, суглобів і ін.).
Для отримання промивних вод хворий вранці натщесерце повинен випити склянку кип`яченої води. Після цього шлунковим зондом збирають води шлунка в стерильний посуд. Потім води центрифугують, мазок роблять з гнійних елементів взятого осаду, обробляють і фарбують простим методом, як мокроту.
Вивчення спинно-мозкової рідини. При підозрі на туберкульозний менінгіт потрібно в перші дні зробити аналіз спинно-мозкової рідини. При взятті спинно-мозкової рідини звертається увага на ступінь тиску, під яким вона випливає з спинномозкового каналу. Рідина, що випливає безперервним струменем і під величезним тиском, говорить про підвищений внутрішньочерепному тиску. Рідина, що виділяється великими нерідкими краплями, говорить про звичайному тиску, а рідкісними малими краплями - про зниженому тиску або про перешкоду для її закінчення.
Матеріал для вивчення беруть в дві стерильні пробірки. Одну залишають на холоді, і через 12-24 год в ній утворюється ласкава паутинообразная плівка. З іншого пробірки беруть ліквор для біохімічних досліджень і вивчення цитограми.
бронхоскопія. У тому випадку, якщо інші способи не зуміли забезпечити постановку діагнозу, використовується збір матеріалу з бронхів, через бронхоскоп. Біопсія вистилають бронхи тканин може час від часу містити звичайні для туберкульозу трансформації, які виявляються при гістологічному вивченні.
плевральна рідина. У плевральній рідині МБТ зможуть бути розпізнані за допомогою флотації, але в більшості випадків виявляються лише в культурі. Чим більша кількість рідини вживається для культурального вивчення, тим імовірніше позитивний підсумок.
біопсія плеври. Біопсія плеври можливо потрібна в тих випадках, в той час, коли є плевральнийвипіт. Для її проведення потрібні навчений персонал, засоби з метою проведення гістологічного вивчення, особлива біопсійна голка.
біопсія легкого. Біопсія легкого повинна виконуватися хірургом в стаціонарних умовах. Діагноз можливо зроблений на базі гістологічного вивчення або виявлення МБТ в секційному матеріалі.
мікроскопія мокротиння
Вже понад 100 років існує найпростіший і швидкий метод виявлення кислотостійких мікобактерій (КУМ) - мікроскопія мазка. КУМ - це мікобактерії, талановиті залишатися пофарбованими крім того після закінчення обробки кислотними розчинами. Вони зможуть бути розпізнані за допомогою мікроскопа в забарвлених прикладах мокротиння.
Мікобактерії відрізняються від інших мікроорганізмів характерним складом своєї клітинної стінки, що складається з міколових кислот. Кислоти завдяки своїм сорбційним властивостям забезпечують властивість забарвлюватися за методиками, що виявляє КУМ.
Резистентність до стандартних способів фарбування і властивість МБТ зберігати раннє фарбування є наслідком великого вмісту ліпідів у зовнішній оболонці клітини. За великим рахунком грампозитивні бактерії в своєму складі мають приблизно 5% ліпідів або воску, грамнегативні організми - близько 20% і МБТ приблизно 60%.
Бактериоскопия мокротиння або іншого виділень проводиться нескладним способом і способом флотації.
При нескладному способі мазки готують з грудочок мокротиння або крапель рідкого речовини (ексудату, промивних вод та ін.). Матеріал поміщають між двома предметними скельцями. Один з мазків фарбують по Граму на неспеціалізовану флору, інший - на туберкульозні мікобактерії.
Основним способом фарбування є карбол-фуксіновий (спосіб Циля-Нільсена). Фундаментальний принцип цього способу - в здатності зовнішньої оболонки МБТ адсорбувати карбол-фуксин. Поглинаючи червоний карбол-фуксин, зовнішня мембрана МБТ так міцно пов`язує фарбу, що її не можна видалити обробкою сірчаної кислотою або солянокислим спиртом. Після цього приклад обробляється метиленовим синім. При емерсіонной мікроскопії МБТ з`являються у вигляді червоних паличок на світло синій тлі.
Починаючи з 1989 р в сучасних лабораторіях флюоресцентная мікроскопія значною мірою витіснила старі методи, засновані на кислотоустойчивости мікобактерій. Даний спосіб базується на тих же властивостях МБТ, пов`язаних з властивістю зовнішньої мембрани МБТ, багатої на ліпіди, утримувати відповідний барвник, в цьому випадку - аурамін-родамін. МБТ, поглинаючи цю речовину, в один момент стійкі до знебарвлення солянокислим спиртом. Поряд з цим МБТ, пофарбовані аурамін-родаміном, флюоресцируют під дією ультрафіолету або інших світлових спектрів, виділених відповідними фільтрами. Під дією ультрафіолету МБТ виявляються як яскраво-жовті палички на темному тлі.
Підготовка прикладу для культурального вивчення
При надходженні в сучасну лабораторію діагностичного матеріалу з імовірним змістом МБТ проводяться наступні діагностичні маніпуляції:
- 1. Обробка матеріалу міколітіческімі розріджують речовинами з метою видалення білкових мас.
- 2. деконтамінації прикладу для видалення супутньої бактеріальної флори.
- 3. струшування суміші і її відстоювання.
- 4. Холодне центрифугування.
- 5. Вміст центрифужной пробірки вживається для мікроскопії посіву на:
- 5.1. щільну яєчну середу (Левенштейна-Йенсена або Фінна III);
- 5.2. агарові середовища (7Н10 і 7Н11);
- 5.3. автоматизовану систему бульйонні культивування (МВ / ВАСТ або ВАСТЕС MGIT 960).
Молекулярно-генетичні методи діагностики МБТ
Розшифровка геному МБТ відкрила необмежені можливості в розробці генетико-молекулярних тестів, а також у вивченні і виявленні МБТ і діагностиці в організмі людини.
Класичні способи, використовувані для виявлення в організмі мікобактерій туберкульозу, такі, як бактеріоскопія, культуральний, імуноферментний, цитологічний, дуже дієві, але відрізняються або недостатньою чутливістю, або тривалістю виявлення МБТ. Розвиток і вдосконалення молекулярно-діагностичних способів відкрило нові можливості для стрімкого виявлення мікобактерій в клінічних прикладах.
Громаднейшее поширення взяв спосіб полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) .
Даний спосіб заснований на ампліфікації особливих фрагментів бацилярних ДНК, яка виявляється в діагностичних прикладах. Тест рекомендований для виявлення МБТ в мокроті або ідентифікації різновиди бактерій, якісь виростають в культуральному середовищі.
Реакція ПЛР дозволяє проводити ідентифікацію МБТ в діагностичному матеріалі за 5-6 год (включаючи обробку матеріалу) і володіє високою специфічністю і чутливістю (в діапазоні від 1-10 клітин в прикладі).
