Медична енциклопедія - ерліха діазореакція

Відео: Ілля Мечников. Герой і мученик науки

Медична енциклопедія - Ерліха діазореакція

Ерліха діазореакція - це якісна проба виявлення біологічно важливих речовин в крові і сечі. Заснована на неспецифічної кольорової реакції між диазореактивом Ерліха і деякими органічними речовинами (пірол, крезол, индикан. Білки. Містять амінокислоти тирозин, триптофан, гістидин та ін.).

Відео: Історія психіатрії. Лікування душевних хвороб по Асклепіадів і Цельсу

Діазореакція в сечі. Реактиви: 1) діазореактів (0,5 г сульфаниловой кислоти і 5 мл 25% розчину соляної кислоти в 100 мл води) - 2) 0,5% розчин азотистокислого натрію.

Методика виконання цієї реакції: до 4 мл I реактиву додають 1-2 краплі II реактиву, доливають 4 мл сечі, потім 1 мл 10% розчину амміака- пробірку закривають пробкою і збовтують рідина до появи піни. Проба вважається позитивною при рожевою або червоною забарвленням і негативною - при жовтої або помаранчевої. Позитивна реакція спостерігається при багатьох гарячкових захворюваннях: черевному і висипному тифі, міліарний туберкульоз, лімфогранулематоз, кору, трихінельоз та ін. При наявності білірубіну в сечі з`являється з диазореактивом червоне забарвлення сечі ще до додавання аміаку.

Діазореакція в крові. Застосовується при визначенні білірубіну, з яким суміш діазореактивом в певних співвідношеннях дає червоне забарвлення. Діазореакція Ерліха лежить в основі більшості методів кількісного і якісного визначення білірубіну (див.).

Ерліха діазореакція (P. Ehrlich) - кольорова реакція між диазореактивом Ерліха і поруч органічних речовин (пірол, крезол, индикан і ін.), Що вступають в з`єднання з азогруппой (-N = N-), яка використовується для кількісного визначення біологічно важливих речовин в крові і сечі.

Відео: Натан Вольф шукає віруси в джунглях

Приготування діазореактивом: в розчин 5 г сульфаниловой кислоти в 50 мл міцної соляної кислоти (d = 1,12) додають воду до об`єму 1 л-до отриманого розчину додають 0,5% розчин азотистокислого натрію. При цьому утворюється діазофенілсульфоновая кислота (реактив Ерліха), яка утворює забарвлені азосоединения з деякими біологічно важливими речовинами, що знаходяться в крові і сечі.

Широке застосування діазореакція Ерліха отримала в клініці при якісному і кількісному визначенні білірубіну в крові (див. Нижче). Діазореактів використовують також для визначення тирозину, гістидину і гістаміну. Білки, в молекулу яких входять амінокислоти - тирозин, триптофан і гістидин, дають з диазореактивом оранжево-червоне забарвлення. При визначенні деяких речовин в якості компонента для отримання забарвленого азосоединения використовується над сульфанілова кислота, а інші циклічні сполуки, наприклад при визначенні фенолів в крові і в сечі - паранітроанілін, при визначенні сульфаніламідів - 2R-кислота і т. Д.

Діазореакція в крові. Білірубін при діазореакція дає характерне червоно-фіолетове забарвлення. Це явище було використано для більшості методів якісного і кількісного визначення білірубіну крові. В даний час найчастіше застосовують метод Ендрашика, що дозволяє визначати окремо фракції білірубіну.

Реактиви: а) кофеїновий реактив: 5 г кофеїну, 7,5 г бензойнокислого натрію і 12,5 г оцтовокислого натрію розчиняють при невеликому підігріванні в дистильованої воді і доливають водою до 0,1 л-б) діазореактів: перший реактив - 1 г сульфаниловой кислоти розчиняють в невеликій кількості води і, додавши 15 мл концентрованої HCl, доливають водою до 1 л-другий реактив - 0,5% розчин азотистокислого натрію.

Перед вживанням змішують 10 мл першого реактиву і 0,25 мл другого. Для визначення загального білірубіну до 1 мл сироватки доливають 3,5 мл кофеїнового реактиву і 0,5 мл діазореактивом, а при визначенні прямого білірубіну до 1 мл сироватки додають 3,5 мл фізіологічного розчину і 0,5 мл діазореактивом. Добре перемішавши, обидві проби через 5 хв. колориметрируют проти компенсаційного розчину, що складається з 1 мл сироватки, 3,5 мл кофеїнового реактиву і 0,5 мл фізіологічного розчину при зеленому світлофільтрі. Непрямий білірубін визначається відніманням із загального прямого.

Діазореакція в сечі складається в додаванні до 10 мл свіжої сечі 10 мл діазореактивом і 2 мл 10% розчину аміаку. При цьому після енергійного збовтування з`являється рожеве або карміново-червоне забарвлення. Реакція вважається позитивною, якщо пофарбовані не тільки рідину, а й піна, що утворилася. Жовтий або оранжевий колір свідчить про негативний результат. У сумнівних випадках утворення на наступний день осаду синьо-зеленого або чорного кольору дозволяє вважати реакцію позитивною. В даний час ця реакція не має практичного значення, так як вона неспецифічна і характерна для багатьох гарячкових захворювань: черевного і висипного тифів, міліарний туберкульоз, полисерозита, кору, лімфогранулематозу, пневмонії, дифтерії, бешихи, трихінельозу. Крім того, лікарські препарати: опій. морфін. діонін, атофан, гексаметилентетрамін. ревінь, героїн, хризаробін, сальварсан - дають схоже забарвлення, а препарати таніну, фенол і його похідні, крезол, гваякол і салол заважають реакції.